AAT Bioquest 自噬测定试剂盒蓝色/绿色荧光

AAT Bioquest 23000/23002 Cell Meter™自噬测定试剂盒*蓝色/绿色荧光*

我们北京云肽生物科技有限公司作为伯乐AAT Bioquest公司的经销商为客户提供，正规进口，保证原装正品，货期稳定，折扣好的服务标准。

AAT Bioquest 自噬测定试剂盒蓝色/绿色荧光-常备现货

美国 AAT Bioquest Inc.(前身是 ABD Bioquest，Inc.)是一家为从事生命科学研究、诊断研发及药物开发的科学家研发、生产和销售生物分析研究试剂和试剂盒的公司。公司致力于光谱学检测领域，包括吸收（颜色），荧光和发光技术。AATBioquest 的产品帮助 quan shi jie 的科学家和生物医药研究者更好的了解生物化学，免疫学，细胞生物学和分子生物学等领域。AAT Bioquest 会不断介绍新产品，快速的丰富各个领域的产品。

AAT Bioquest  23000  Cell Meter™ 自噬检测试剂盒 *蓝色荧光*  200 Tests

AAT Bioquest  23002  Cell Meter™ 自噬检测试剂盒 *绿色荧光*  200 Tests

AAT Bioquest 自噬测定试剂盒蓝色/绿色荧光-常备现货 

AAT Bioquest  23000  Cell Meter™ 自噬检测试剂盒 *蓝色荧光*  200 Tests，产品说明：

自噬是一种进化上保守的降解过程，它靶向长寿命的蛋白质、细胞器和其他细胞质成分，通过溶酶体途径进行降解。自噬途径与泛素-蛋白酶体途径的作用相辅相成，泛素-蛋白酶体途径通常降解短寿命蛋白质。自噬途径的激活是多种细胞作用所必需的，包括饥饿期间的存活、细胞内成分的清除、发育和免疫。在没有压力的情况下，自噬具有内务管理功能，去除受损的细胞器和细胞成分，防止细胞毒性作用。自噬的减少和缺陷与多种疾病有关，例如亨廷顿舞蹈症、阿尔茨海默氏症和帕金森氏症。在癌症发展方面，自噬似乎起着多种作用。某些自噬蛋白（如Beclin-1和Bif-1）的表达减少或缺失会增加小鼠的肿瘤易感性，而这些蛋白的过表达可以抑制癌细胞的生长。然而，自噬对于实体瘤营养贫乏和缺氧核心内癌细胞的存活至关重要。细胞计™自噬试剂盒采用自噬蓝™作为特定的自噬体标记物来分析自噬的活性。该测定针对直接检测分离和附着细胞中的自噬进行了优化。该试剂盒提供了检测方案的所有基本组件。细胞计™自噬试剂盒适用于荧光显微镜，荧光酶标仪。

组件

组分A：500X Autophagy Blue™—1 瓶 （50 μL）

组分B：染色缓冲液—1 瓶 （25 mL）

组分C：洗涤缓冲液—1 瓶 （100 mL）

1.    用1 - 2 × 10的测试化合物制备细胞4细胞/孔

2.    添加自噬蓝™工作溶液

3.    在 37°C 下孵育 15 - 60 分钟

4.    用洗涤缓冲液洗涤细胞

5.    监测Ex / Em= 330/520 nm（截止= 475 nm）处的荧光增加，带有DAPI滤光片组的荧光显微镜

重要说明：在开始实验之前，请在室温下解冻所有组分。

工作溶液的制备

将 20 μL 500X 自噬蓝（组分 A）加入 10 mL 染色缓冲液（组分 B）中，充分混合制成自噬蓝™™工作溶液。避光。注意：20 μL 500X 自噬蓝™（组分 A）足以用于一个 96 孔板。

实验方案样本

1.    根据您的特定诱导方案将细胞培养至 zui shi he 自噬诱导的密度（约 1 - 2 x 104细胞/孔/96孔板）。同时，对于每个标记条件，以与诱导群体相同的密度培养非诱导阴性对照细胞群。

2.    取出介质。

3.    向每个孔中加入 100 μL/孔（96 孔板）或 25 μL/孔（384 孔板）自噬蓝™工作溶液。

4.    将细胞在 37°C、5% CO 中孵育2培养箱15至60分钟。注意：适当的孵育时间取决于所使用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。

5.    用洗涤缓冲液（组分C）洗涤细胞3-4次，然后向每个孔中加入100μL洗涤缓冲液（组分C）。注意：建议增加标记浓度或孵育时间，以便在细胞似乎没有充分染色的情况下让染料积聚。

6.    使用荧光酶标仪在Ex / Em = 330/520 nm（截止= 475 nm）下监测荧光强度，带有DAPI滤光片组的荧光显微镜。

AAT Bioquest  23002  Cell Meter™ 自噬检测试剂盒 *绿色荧光*  200 Tests，产品说明：

该 Cell Meter™ 自噬试剂盒采用 Autophagy Green™ 作为特异性自噬体标记物来分析自噬活性。该检测经过优化，可直接检测分离细胞和附着细胞中的自噬。该试剂盒为检测方案提供了所有必需的组分。Cell Meter™ Autophagy Kit适用于荧光显微镜、荧光酶标仪和流式细胞仪。Autophagy Green™ 有很大的 Stokes 位移。自噬是一种进化上保守的降解过程，它靶向长寿命的蛋白质、细胞器和其他细胞质成分，通过溶酶体途径进行降解。自噬途径与泛素-蛋白酶体途径的作用互补，泛素-蛋白酶体途径通常降解短寿命蛋白质。自噬途径的激活是多种细胞作用所必需的，包括饥饿期间的生存、细胞内成分的清除、发育和免疫。在没有压力的情况下，自噬具有管家功能，去除受损的细胞器和细胞成分，防止细胞毒性作用。自噬的减少和缺陷与多种疾病有关，例如亨廷顿病、阿尔茨海默病和帕金森病。在癌症发展方面，自噬似乎起着多种作用。某些自噬蛋白（如 Beclin-1 和 Bif-1）的表达减少或缺失会增加小鼠的肿瘤易感性，而这些蛋白的过表达会抑制癌细胞的生长。然而，自噬对于实体瘤营养不良和缺氧核心内癌细胞的存活至关重要。

流式细胞仪

兴奋：488 nm 激光器

排放：530/30 nm 滤光片

仪器规格：FITC国际渠道

荧光显微镜

兴奋：FITC荧光过滤器

排放：FITC荧光过滤器

推荐盘子：黑色墙壁/透明底部

荧光酶标仪

兴奋：485海里

排放：530海里

近路：515海里

推荐盘子：黑色墙壁/透明底部

仪器规格：底部读取模式

组件

组分 A：500X 自噬绿色™—1 瓶 （50 μL）

组分 B：染色缓冲液—1 瓶 （25 mL）

组分C：洗涤缓冲液—1 瓶 （100 mL）

使用测试化合物制备细胞

添加自噬绿色™工作溶液

在 37°C 孵育 15 - 60 分钟

使用洗涤缓冲液洗涤细胞

监测Ex / Em = 485 / 530nm（截止= 515nm）处的荧光增加，荧光显微镜与FITC滤光片组或流式细胞仪与530 / 30nm滤光片（FITC通道）

重要提示：在开始实验之前，在室温下解冻所有组分。

工作溶液的制备

将 20 μL Autophagy Green™（组分 A）加入 10 mL 染色缓冲液（组分 B）中，充分混合以制备 Autophagy Green™ 工作溶液。避光。注意：20 μL 500X 自噬绿™液（组分 A）足以用于一个 96 孔板。注意：将未使用的 500X Autophagy Green™ 等分并储存在 < -20ºC 下。 避光，避免反复冻融循环。

实验方案样本

1.    根据您的特定诱导方案（约 1-2 × 104细胞/孔/96孔板）。同时，在每种标记条件下，以与诱导细胞群相同的密度培养非诱导阴性对照细胞群。

2.    取出培养基。

3.    向每个孔中加入 100 μL/孔（96 孔板）或 25 μL/孔（384 孔板）的 Autophagy Green™ 工作溶液。

4.    将细胞在 37°C、5% CO 中孵育2孵育 15 至 60 分钟。注意：适当的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。

5.    用洗涤缓冲液（组分C）洗涤细胞3-4次，然后向每个孔中加入100μL洗涤缓冲液（组分C）。注意：如果细胞看起来没有充分染色，建议增加标记浓度或孵育时间，以使染料积累。

6.    使用Ex / Em = 485 / 530nm（截止= 515nm）的荧光酶标仪，带有FITC滤光片组的荧光显微镜或带有530 / 30 nm滤光片（FITC通道）的流式细胞仪监测荧光强度。

产品订购信息：

AAT Bioquest  23000  Cell Meter™ 自噬检测试剂盒 *蓝色荧光*  200 Tests

AAT Bioquest  23002  Cell Meter™ 自噬检测试剂盒 *绿色荧光*  200 Tests