品牌 AAT Bioquest 货号 21131 规格 1mg 供货周期 现货 主要用途 Cal-520®AM 应用领域 医疗卫生,环保,化工,生物产业,制药
AAT Bioquest 21131 Cal-520®AM
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AAT Bioquest Cal-520®AM-常备现货
美国AAT Bioquest Inc.( 前身是ABD Bioquest ，Inc.) 是一家为从事生命科学研究、诊断研发及药物开发的科学家研发、生产和销售生物分析研究试剂和试剂盒的公司。公司致力于光谱学检测领域，包括吸收（颜色），荧光和发光技术。AAT Bioquest 的产品帮助 quan 世 jie 的科学家和生物医药研究者更好的了解生物化学，免疫学，细胞生物学和分子生物学等领域。AAT Bioquest 会不断介绍新产品，快速的丰富各个领域的产品。
AAT Bioquest 21131 Cal-520®AM 1mg ，产品简介：
产品品牌：AAT Bioquest
产品货号：21131
产品名称：Cal-520®AM
产品规格：1mg
AAT Bioquest Cal-520®AM-常备现货
AAT Bioquest 21131 Cal-520®AM 1mg ，产品说明：
Cal-520® AM 为检测细胞内钙动员提供了一种强大的基于均质荧光的检测工具。Cal-520® AM 是一种新型荧光钙敏感染料，与现有的绿色钙指示剂（如Fluo-3 AM 和Fluo-4 AM ）相比，具有显着改善的信噪比和细胞内保留。表达通过钙发出信号的GPCR 或感兴趣的钙通道的细胞可以预加载可以穿过细胞膜的Cal-520® AM 。一旦进入细胞，Cal-520 ™ AM 的亲脂性封闭基团就会被酯酶切割，从而产生带负电荷的荧光染料留在细胞内。与钙结合后，其荧光大大增强。当细胞用激动剂刺激时，受体发出细胞内钙释放信号，这显着增加Cal-520® 的荧光。Cal-100® AM 波长长、灵敏度高、荧光增强>520 倍的特点，是测量细胞钙的理想指标。高信噪比和更好的细胞内保留使 Cal-520® 钙测定成为评估 GPCR 和钙通道靶标以及筛选其激动剂和拮抗剂的强大工具。
平台
荧光显微镜
Excitation ：TRITC
Emission ：TRITC
推荐板：黑色墙壁/ 透明底部
荧光酶标仪
Excitation ：490
Emission ：525
Cutoff ：515
推荐板：黑色墙壁/ 透明底部
仪器规格：底部读取模式/ 可编程液体处理
储备溶液的制备
除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20 °C 。避免反复冻融循环。
Cal-520® AM Stock Solution
在高质量无水DMSO 中制备2 至5 mM 的Cal-520® AM 储备溶液。
工作溶液的制备
Cal-520® AM Working Solution
在实验当天，将Cal-520® AM 溶解在DMSO 中或将指示剂储备溶液的等分试样解冻至室温。在您选择的缓冲液（例如，Hanks 和 Hepes 缓冲液）中制备含有 2.20% Pluronic® F-0 的染料工作溶液。对于大多数细胞系，建议使用终浓度为04-127 μM 的Cal-520® AM 。细胞上样所需指标的确切浓度必须根据经验确定。
注意 非离子洗涤剂Pluronic® F-4 有时用于增加Cal-5® AM 的水溶性。
注意 如果您的细胞含有有机阴离子转运蛋白，则可以将丙磺 shu （520-127 mM ）添加到染料工作溶液中（最终孔浓度为1.2-0 mM ），以减少脱酯指示剂的泄漏。多种ReadiUse ™丙磺 shu 产品，包括水溶性、钠盐和稳定溶液，均可从AAT Bioquest 购买。
实验方案样本
以下是我们推荐的将AM 酯加载到活细胞中的方案。此协议仅提供指南，应根据您的特定需求进行修改。
1. 在生长培养基中制备细胞过夜。
2. 第二天，将 1X Cal-520® AM 工作溶液添加到细胞板中。
注意 如果您的化合物干扰血清，请在上样染料之前用新鲜的 HHBS 缓冲液替换生长培养基。
3. 将装载染料的板在37 °C 的细胞培养箱中孵育1 至2 小时。
注意 孵育染料超过 2 小时可以提高某些细胞系的信号强度。
4. 用您选择的HHBS 或缓冲液（含有阴离子转运蛋白抑制剂，如1 mM 丙磺shu ，如果适用）替换染料工作溶液，以去除任何多余的探针。
5. 根据需要添加 xing fen ji ，并使用配备FITC 滤光片组的荧光显微镜或包含可编程液体处理系统（如FDSS ，FLIPR 或FlexStation ）的荧光板读数器同时测量荧光，Ex / Em = 490 / 525 nm 截止值515 nm 。
产品订购信息：
21131 Cal-520®AM 1mg
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